1.無菌檢驗人員負責無菌室的溫濕度記錄，溫度應控制在18-26℃，相對濕度控制在30-65%。
2.無菌室內，非操作人員一律不得入內。與試驗無關的一切物品不得帶入無菌室內。無菌室內的實驗器具必須專用。
3.無菌室內必須保持清潔干燥，每使用一個月必須對無菌室進行潔凈度檢查；定期用3-5%苯酚或0.1%新潔爾滅溶液等消毒劑擦拭地面。
4.無菌操作前，需將試驗物品先放入緩沖間，清潔表面后再帶入無菌室，在操作期間不得再將室外物品帶入無菌室。
5.進行無菌操作前，應用75%酒精消毒桌面，打開無菌室、超凈工作臺及緩沖間的紫外燈，以紫外線照射**少1小時，然后打開超凈工作臺的空氣過濾器，凈化20分鐘后再進入。
6.進入無菌室前，雙手必須先在0.1%新潔爾滅溶液中浸泡消毒，在緩沖間穿好消毒的無菌室專用工作服、口罩、帽子和拖鞋。進入無菌室后，操作未完成前不得再出無菌室。
7.無菌室內，不得進行與無菌試驗無關的試驗。
8.在操作中，若污染了桌面、地面、衣服等，應及時消毒處理。雙手應在消毒液中浸泡后才能離開無菌室。
9.凡沾有活菌材料器皿，用畢后須隨時投入5%來蘇爾或2%鹽酸液中浸泡，或經高壓后才能離開無菌室。
10.在進行無菌操作時必須做無菌對照，如發現問題時應及時查明原因，進行處理。
11.操作人員應嚴格按照無菌操作的規程進行操作。
12.每次進入無菌室的人數不超過3人。
13. 操作結束后，應用75%酒精擦洗桌面，雙手在消毒液中浸泡
后，用肥皂洗凈。